(Terrestre) Comunicaciones de Congresos
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Publicación Acceso Abierto Biofuncionalización de superficies de nylon con anticuerpos antiricina para su uso en inmunobiosensores(Ministerio de Defensa, 2019-02-15) Peraile, Inés; Gil García, Matilde; Murillo, Nieves; Maudes, Jon; Rozas Sanz, Gabriel; González López, Laura; Dabbagh Escalante, Nushin Alba; Pérez, Ana; Cabria Ramos, Juan Carlos; Lorenzo Lozano, Paloma"Los agentes de guerra biológica constituyen un riesgo creciente en la actualidad. Por ello, la mayoría de los países invierten en la investigación y el desarrollo de técnicas de detección e identificación de dichos agentes, siendo un objetivo prioritario el desarrollo de dispositivos que permitan una identificación temprana in situ lo más específica y sensible posible. Dentro de estos dispositivos, los inmunobiosensores (basados en técnicas inmunológicas) resultan ser los candidatos de elección, puesto que la unión antígeno-anticuerpo es rápida y altamente específica. En un inmunobiosensor el tipo de sensado determinará el umbral de detección, mientras que la especificidad y sensibilidad de la detección dependerá de los anticuerpos seleccionados y de la forma en que estos son inmovilizados. Es por ello por lo que, tanto la superficie como el método de inmovilización, determinarán la densidad y orientación del anticuerpo inmovilizado y, en consecuencia, la eficiencia de la unión antígeno-anticuerpo y el éxito del sistema de inmunocaptura. La elección de un modelo experimental de inmunocaptura similar al modelo final en el inmunobiosensor es fundamental. Así, se diseñó un modelo de inmunocaptura en el que se marcaron con diferentes fluoróforos el anticuerpo y el antígeno, y se determinaron diferentes parámetros (densidad de anticuerpo inmovilizado, de antígeno inmunocapturado y eficacia del sistema) con el fin de realizar el seguimiento del proceso de inmovilización y de inmunocaptura. Dicho modelo de inmunocaptura se empleó para el estudio y la comparación de diferentes superficies y métodos de inmovilización. En una primera fase, estos estudios se desarrollaron con simulantes de agentes de guerra biológicos. En una segunda fase, se emplearon agentes reales, como ricina. Nuestro modelo de inmunocaptura y los parámetros considerados han resultado ser adecuados y versátiles para el estudio y comparación de diferentes superficies y modelos de inmovilización."Publicación Acceso Abierto Evaluación de detectores de aerosoles biológicos en túnel de viento(Ministerio de Defensa, 2019-02-15) Dabbagh Escalante, Nushin Alba; Rozas Sánz, Gabriel; Peraile, Inés; González López, Laura; Cabria Ramos, Juan Carlos; Lorenzo Lozano, Paloma"Durante el siglo pasado, los avances en biotecnología y bioquímica han simplificado el desarrollo y la producción de armas biológicas. Estas pueden ser más potentes que las armas convencionales o las armas químicas por su alta contagiosidad, fácil difusión y la cantidad mínima de organismos requeridos para causar enfermedad y/o muerte. Los agentes biológicos que tienen mayor probabilidad de ser utilizados como armas biológicas son bacterias, rickettsias, virus y toxinas, y la vía de dispersión de mayor interés desde el punto de vista de la seguridad y la defensa son los bioaerosoles. Desde los ataques con ántrax producidos en 2001 en EE.UU., los países han incrementado considerablemente los esfuerzos en investigación para el desarrollo de nuevas tecnologías que permitan una detección temprana de las amenazas biológicas. Disponer de sistemas de detección en tiempo real y con una elevada sensibilidad permite minimizar los riesgos de exposición a este tipo de agentes, ya que la información obtenida puede ser utilizada para adoptar medidas de protección y prevención apropiadas a la amenaza detectada. El área de defensa biológica del Departamento de Sistemas de Defensa NBQ y Materiales Energéticos de la Subdirección General de Sistemas Terrestres del INTA (Campus La Marañosa) ha puesto a punto una metodología para evaluar nuevos equipos de detección de aerosoles biológicos. La eficacia de estos equipos se ha analizado en términos de tiempo de respuesta, sensibilidad y capacidad para diferenciar entre eventos biológicos y no biológicos. Los ensayos se han realizado en un túnel de viento (diseñado por la empresa Ibatech) sobre el que se inyectan aerosoles biológicos de concentraciones conocidas. Para la generación de la nube se han utilizado simulantes de agentes de guerra biológica (Bacillus thuringiensis como simulante de Bacillus anthracis y Pantoea agglomerans como simulante de Yersinia pestis)."Publicación Restringido Biofunctionalization of nylon nanofibers to be used in immunobiosensor for biological warfare agents detecting(Formatex Research Center, 2018) Peraile, Inés; Lorenzo Lozano, Paloma; Murillo, N.; Maudes, J.; Rozas Sanz, Gabriel; Pérez Márquez, Ana; González López, Laura; Cabria Ramos, Juan Carlos; Gil García, MatildeThe use of biological warfare agents involves a growing threat to society. Thus, the most countries have been forced to increase resources in research for their detection and identification. One of the critical points in the effective fight against these agents is the development of devices that allow their detection and early identification. The best choice is the immunobiosensors easy to use on-site. However, how the antibody is attached to the biosensor surface, in terms of density and orientation, will determine the diagnosis capability of the device. In this study, both a functional nanofiber able to increase the surface / volume relation, and a chemicallysimilar planar membrane were used as support for the immobilization of antibodies. Different antibody immobilization systems were carried out to biofunctionalize both surfaces: passive adsorption, covalent bond by glutaraldehyde and well-oriented immobilization by protein A/G. Our results showed that nanofibers in combination with protein A/G were a very effective immunocapture system for being used in a biosensor.Publicación Restringido lnactivation and identification of Bacillus anthracis spores(Wageningen Academic Publishers, 2013-12) Gil García, Matilde; Peraile, Inés; Jiménez Pérez, M. V.; Cabria Ramos, Juan Carlos; Lorenzo Lozano, PalomaBacillus anthracis endospores must be handled ata biosafety level-3 (BSL-3} eontainment facility, therefore an appropriate inaetivation procedure is essential in order to both detect thcm in a reliable and rapid way and to avoid human infections from antrax-contamined samples if a biosafety level-3 laboratory is not availablc. Unfortunatcly, donnant spores exhibit incredible hardiness against gennicidal agents. The most effective methods for inactivating spores are usually the chemical treatment, heat inactivation (boiling, moist hcat, dry heat) and irTadiation (microwave, UV, gamma, electron beam). The inactivation method used must alter thc cell structure as little as possible in order to ensure a corree! diagnosis by diferent techniques. Several kinds ofphysical and chemical inactivation methods wcrc assessed in order to define the conditions that ensure inactivation of endospores of B. anthracis 34F2 Sterné and pcrmit, at the same time, its identification by PCR and immunoassays techniques.Publicación Restringido Reuse of nanofibers in a Biological Warfare Agent detection nanophotonic sensing device(CBRNE Research and Inovation, 2019-05-29) Peraile, Inés; Lorenzo Lozano, Paloma; González López, Laura; Murillo, Nieves; Dabbagh Escalante, Nushin Alba; Rozas Sanz, Gabriel; Cabria Ramos, Juan Carlos; Gil García, Matilde"The use of biological injurious agent ravages not only at human population but also at livestock and crops [1], causing effects both on human health and on the economy [2]. Therefore, the fast and specific detection of these biological injurious agents is necessary in many fields such as environmental control, clinic diagnostic, food industry, Security and Defence. Therefore, much effort has been devoted to the development of new technologies for their detection and identification. The priority objective is to carry out a low cost, easy-of-use and specific device to be used on site and able to be miniaturized [3]. In order to meet this need, the specificity of the antigen-antibody binding is applied in a multitude of biosensors. Among these immuno-biosensors, biological warfare agent detection equipment stands out. Provided both the high costs for this equipment and the need for the first responders to move into the CBRN accident area, it could be desirable to have reusable detection devices. In the OPTONANOSENS project, an immuno-biosensor with nanophotonic sensing has been developing. In this device, nylon nanofibers with 5% pyridine, manufactured by Tecnalia laid on a metallic support is used to immobilized antibodies [4,5]. The aims of this work are both to make a comparison between several procedures which let these nanofibers to be reused in different detection events and the optimisation of the more suitable procedure which allows a repetitive use and reliable of the biofunctionalized nanofibers in the final sensing device."










